关于肾上腺皮质类固醇激素的研究

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1材料与方法

1.1动物模型及分组纯系昆明小鼠，20～22g，8～10周，雌雄各半，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。参照WHO免疫研究教学中心（WHOIMMUNOLOGYRESEARCHANDTRAININGCENTRE）TitoCavallo［3］、Francisco［4，5］的报道方法造模，于造模前2h按分组灌胃给予相应药物。将75只小鼠随机分为5组，设A组为正常对照组，B组为模型对照组，给予等量的生理盐水灌胃；C组用祛毒胶囊水溶液治疗，给予生物0.5ml/（20g·d），浓度为4g/ml；D组用醋酸泼尼松治疗，0.5m/（20g·d），溶液浓度为0.312g/ml；E组用祛毒胶囊、醋酸泼尼松联合治疗，醋酸泼尼松给予溶液0.25ml/（20g·d），中药0.25ml/（20g·d）。

1.2药品与试剂新药祛毒胶囊由黑龙江中医药大学提供。醋酸泼尼松，规格5mg×100片/瓶，上海信谊药业有限公司出品，批号：030401。LPS购于北京拜尔迪生物公司，目录号为L-2880。IL-10，antids-DNA试剂盒购于TPIInc.1703734thAve，SuiteGLynnwood，Washington98003U.S.A.考马斯亮蓝G250(Fluka进口分装）。

1.3仪器酶标仪，恒温箱，显微镜。

1.4血清IL-10、抗ds-DNA抗体含量的测定于第15天采用摘眼球取血的方法制备血清标本，按试剂盒说明操作检测各项指标。

1.5考马斯亮蓝法检测蛋白尿用牛血清白蛋白制作标准曲线，将测得的OD值带入标准曲线方程，得蛋白尿浓度。将蛋白尿浓度与24h尿量相乘，得到24h尿蛋白总量。

1.6SLE鼠肝肾病理检查摘眼球处死小鼠后，取出肝、肾做石蜡切片观察病理改变。

1.7统计学方法采用SPSS10.0统计软件包进行统计学处理，所有资料均用(x±s)表示，采用多样本均数比较的方差分析法。

2结果

2.1祛毒胶囊治疗SLE样小鼠IL-10、ds-DNA、尿白蛋白水样的影响见表1。模型组IL-10、抗ds-DNA抗体、2h尿白蛋白水平明显高于其他各组，差异有显著性（P＜0.05）。各药物治疗组对IL-10分泌的影响与空白组比较，差异无显著性（P＞0.05）。对ds-DNA抗体的影响，各药物治疗组间差异无显著性（P＞0.05）。对24h尿白蛋白水平的影响，中药组和联合用药组差异无显著性（P＞0.05）。

表1祛毒胶囊治疗SLE样小鼠IL-10、ds-DNA、尿白蛋白水平的影响(x±s)

注：*P＜0.05，**P＞0.05

2.2肝肾病毒改变模型组动物肾小球毛细血管丛增生，充血，内皮细胞肿胀，集合管腔内见蛋白管型，近曲小管，基膜增厚。肝细胞严重脓肿，可见小灶性坏死，小叶中央静脉扩张淤血，汇管区内见有大量淋巴细胞浸润，并有少量胆色素颗粒。说明所造动物模型符合SLE病理改变特点（另外报道）。

3讨论

细胞因子是活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的具有调节免疫功能的小分子多肽，在SLE免疫应答中起决定作用［2］。代写艺术论文白介素10（IL-10）是近年来发现的重要免疫调节因子和抗炎因子，属Th2型细胞因子，主要由单核巨噬细胞、T和B淋巴细胞产生，是一种多效应的细胞因子。其主要的生物作用为抑制巨噬细胞的抗原提呈功能，抑制Th1型细胞INF-γ、IL-2、TNF-α等细胞因子的合成，是免疫系统中显示抑制作用的重要因子。大量试验证明Th2细胞因子合成增多，特别是IL-10的增多与SLE发病机制的关系最为密切［6］。SLE患者血清IL-10水平显著高于正常人，无论是初发者，还是病情反复发作者，无论是活动期还是缓解期，始终高于正常人。有临床试验显示：SLE病情活动与IL-10上调有关，提示异常表达的IL-10细胞因子对SLE有致病作用［7］。IL-10水平及表达能力与狼疮性肾炎（LN）、抗ds-DNA抗体有密切关系，IL-10是一种典型B细胞刺激因子，它可以刺激SLE病人外周血单个核细胞产生ds-DNA抗体，并诱导细胞凋亡，而抗ds-DNA抗体又能刺激单个核细胞分泌IL-10增加，二者形成恶性循环，导致病情进展［8］。

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